Métodos de iluminación del microscopio

Iluminación transmitida

Ilumina la superficie posterior de la muestra. Este método es adecuado para la observación biológica, como las células incoloras y transparentes, y se utiliza en los microscopios biológicos generales. Hay dos tipos de iluminación transmitida: campo claro y campo oscuro:

- Iluminación de campo claro

Un método general para observar muestras iluminando la superficie posterior para hacerla transparente. Contra un fondo brillante, proyecta las partes más oscuras que el fondo.

- Iluminación de campo oscuro

Ilumina la superficie posterior, como con la iluminación de campo claro, pero interrumpe la luz directa para hacer brillar el contorno de la muestra sobre un fondo oscuro. Este método es adecuado para la observación de células con poco contraste y requiere un condensador de campo oscuro.

Iluminación incidente

Ilumina la superficie frontal de una muestra. Este método es útil para observar objetos en 3D, como materiales y otras muestras industriales, así como muestras opacas. Los microscopios estereoscópicos suelen utilizar este tipo de iluminación.

Iluminación Koehler

Recoge la luz en la parte posterior de la lente de objetivo. Es el método más utilizado para la iluminación transmitida y presenta una iluminación brillante y menos variada. Este método es indispensable para la observación con grandes aumentos.

Iluminación difusa

Una placa difusora de luz colocada sobre el reflector permite una iluminación uniforme, pero el paso de la placa hace que la luz sea ligeramente menos brillante.

Iluminación crítica

Reúne la luz en la superficie de una muestra. Este método genera una iluminación brillante, pero tiene una mayor probabilidad de distribuirse de forma desigual.

Para los microscopios ópticos

- Luz natural (luz ambiental)

La luz del exterior se envía al espejo reflector para iluminar la muestra. Debe evitarse la luz solar directa. También se puede utilizar una fuente de luz artificial, como la luz fluorescente, en lugar de la luz natural.

- Lámpara de tungsteno

Esta lámpara barata y fácil de conseguir, también llamada lámpara incandescente, se utiliza mucho en los microscopios ópticos.

- Lámpara halógena

En comparación con la lámpara de tungsteno, la lámpara halógena es más cara, tiene una vida útil más larga y presenta un color casi blanco con una luminosidad uniforme.

Para microscopios de fluorescencia

- Lámpara de mercurio

También conocida como lámpara de mercurio de alta presión, esta lámpara se utiliza como fuente de luz para la observación de la fluorescencia para excitar una longitud de onda específica del material fluorescente. Puede proporcionar una gran potencia en una extensa gama de longitudes de onda, desde el ultravioleta hasta el infrarrojo cercano, y puede transmitir la luz de una longitud de onda requerida utilizando un filtro. Existe una gran variedad de filtros para diferentes longitudes de onda, y se puede detectar selectivamente una fluorescencia específica cuando se utiliza una combinación adecuada de colorante de fluorescencia. Otro tipo de lámpara de mercurio es la lámpara de haluro metálico que requiere una fuente de alimentación de alto voltaje para funcionar.

- Lámpara de xenón

Este tipo de lámpara se utiliza generalmente como flash en las cámaras y se caracteriza por su alta luminosidad.

- Lámpara LED

Dado que los LEDs emiten luz con una banda de longitud de onda relativamente estrecha, se puede obtener luz blanca combinando un LED y un material fluorescente o una combinación de múltiples LEDs. Se caracteriza por su tamaño compacto, su bajo consumo de energía y su larga vida útil, pero la potencia puede ser escasa en determinadas longitudes de onda dependiendo de cómo se combinen los LED.